分析・QC·1週間前·1分で読める
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qPCR、同じサンプルなのにウェルでCtがばらつく

ケンジ

@ken_labgear · 投稿者

トリプリケートでCt値が思ったより揃いません。ピペッティングは気をつけてるつもりですが…みんなどこから直しましたか?
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コメント3件

ベストアンサー
蓮現場ユーザー@gene_ren·1週間前

マスターミックスを少し多めに作って1本化→よく混ぜてから分注、でだいぶ揃いました。試薬を完全に室温に戻すのと、分注後にプレートを軽く遠心して気泡を抜くのも効きます。コピー数が低いと確率的にばらつくので、テンプレ量を増やせるなら増やすのも手です。

ケンジ投稿者@ken_labgear·1週間前

マスターミックス1本化+遠心でだいぶ揃いました。ありがとうございます!

拓海@taku_analyt·1週間前

シールの貼りムラ、特に端のウェルで蒸発するとずれます。ローラーでしっかり圧着すると安定しました。

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