HCP（宿主細胞タンパク質）ELISA、感度と回収率のバリデーションどう組んでます？

Question

プロセス除去評価で、抗体の希釈直線性とスパイク回収が合いません。プラットフォーム抗体 vs プロセス特異抗体の切替判断も含め、経験談ください。

そら · Accepted Answer

希釈直線性が崩れるのは、だいたいマトリックス干渉かHCPの反応性ギャップでした。最小希釈（MRD）をきちんと決めて、スパイク回収はMRD付近で評価するのがコツです。プラットフォーム抗体でカバレッジが足りない工程は、プロセス特異抗体への切替を早めに判断。2D電気泳動などオルソゴナルでカバレッジを一度確認すると迷いが減ります。

なお · Answer

カバレッジの確認は大事ですね。うちはantibody affinity extractionでギャップを可視化してから切替を決めました。

こと · Answer

キットはプラットフォーム品とプロセス特異品でダイナミックレンジが違うので、QC規格に入れる前に一度並べて評価しておくと安心です。